SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明

SBI無外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說明

產品名稱：無外泌體血清|去除外泌體胎牛血清

貨號：EXO-FBS-50A-1

規格：50ml

備注：少量現貨，干冰運輸......

一、外泌體的基本信息

⊙外泌體的大小：外泌體的直徑約40-150nm

⊙從研究上來講并不太嚴格區分外泌體（exosomes）或微泡（microvesicles）

⊙外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡

⊙外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm

⊙外泌體的數量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細胞產生1000-10000個

⊙外泌體的細胞源：人體中幾乎所有類型的細胞均能產生外泌體

⊙外泌體具有異質性，即使是同一種細胞分泌的外泌體都有可能具有很大功能區別

⊙外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細胞間隙、體液中

什么是外泌體？

答：Exosome，中文名外泌體，是一種能被大多數細胞分泌的微小膜泡，具有脂質雙層膜結構，直徑大約40-100 nm。細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體，它的主要來源是細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到細胞外基質中。外泌體天然存在于體液中，包括血液、尿液、唾液、腦脊液及乳汁中，參與細胞間通訊。

外泌體研究，應選用血漿還是血清？

答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。

血漿=血液-血細胞  

血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子

所以一般實驗選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關的疾病的時候，當然是血清更適合。

二、外泌體研究的主要應用
外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了腫瘤的生長與侵襲。
腫瘤

• 腫瘤轉移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血病（AML）細胞的增殖、遷移和抑制細胞凋亡。
• 治療靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRAS G12D，從而特異性高效靶向至胰腺癌細胞，以顯著降低RAS活化、癌細胞增殖和轉移過程。

免疫

• β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外，并可轉移到其他代謝器官或免疫內皮細胞，有利于維持葡萄糖體內平衡或造成胰島素抵抗。

心血管

• 外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內皮細胞導致了內皮細胞的損傷促進動脈粥樣硬化

分子標記

• 疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、病毒性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞癌中發現循環EVs的水平上升。
• 預后標志。

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蘇州千舍帶你了解下外泌體！ 外泌體到底是個啥？莫愁：外泌體么，簡單點講就是：“老司機，帶帶我……”。大概就是在細胞內部由細胞內多泡體形成的一個囊泡，裝載了一堆亂七八糟的東西，然后分泌出體外，然后進入另一個細胞，把這堆亂七八糟的東西卸車的一個過程。

外泌體大小跟病毒差不多大，反正是蠻小的了。

所以外泌體的研究方法基本是這樣的：

首先，用無外泌體的血清培養基進行培養，否則就干擾了。

接著，就是低速離心去除細胞。

然后通過過濾，剛剛也說過大小了哈，過濾后，把細胞微泡去除掉，剩下的就是外泌體了。

接著高速離心，富集外泌體：

然后，研究的套路一般都是進行外泌體的鑒定，可以通過電鏡，或者WB來鑒定，因為外泌體是有標志物的，像下面這樣：

這時候可以選擇細胞內質網的特異性分子Calnexin來作為陰性對照。

用外泌體也可以做流式分析，但是，外泌體做流式分析，但是，你要記住外泌體很小，跟病毒差不多大。所以做流式前要用包被了抗體的珠子（beads）先結合上外泌體，然后進行流式的分析，就像這樣：

實關鍵還是在外泌體內部的那些miRNA和mRNA的抽提和鑒定，研究外泌體的具體機制，還是靠上車的這堆貨。

現在大概了解外泌體研究要做些什么了吧？

一般來說，這個老司機帶上車的都是些miRNA和mRNA，不過大概也有lncRNA，有的時候不巧也會有點DNA。下面就是外泌體里一般的RNA分布，有蠻多miRNA，所以老司機外泌體有可能會參與某些調控機制。

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