如何挑選合適的elisa試劑盒？

更新時間：2022-05-11

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如何挑選合適的elisa試劑盒？

1、查找待測樣本的蛋白濃度

　　可以通過NCBI的文獻(xiàn)，給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較elisa試劑盒給出的樣本值與報道值是否一致。

2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類

　　除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。

3、•.檢測范圍：

•建立線性范圍：需測定9-11個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定3-4次。

•驗證標(biāo)稱線性參數(shù)：需測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定3-4次。

•所有樣本應(yīng)在一次運行中或幾次間隔很短的運行中隨機(jī)測定，最好在一天之內(nèi)完成。

4、試劑盒的其它指標(biāo)

a. 靈敏度：

•示例：人IL-13的低可檢測濃度為0.1 pg/ml(6 次獨立實驗的平均值)。10 個零標(biāo)準(zhǔn)品濃度 OD 的平均值加上兩倍SD，計算低可檢測濃度。

•注意：靈敏度跟檢測范圍低點不相等。

b.•穩(wěn)定性（重復(fù)性、精密性）

•酶標(biāo)板內(nèi)精密度3 個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定 20 次，評估酶標(biāo) 板內(nèi)的精密度。酶標(biāo)板間精密度 3 個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測 6 次，評估酶標(biāo)板間的精密度。

•試劑盒一般板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% （統(tǒng)計學(xué)概念）

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