<bdo id="6kqy6"></bdo>
  • <button id="6kqy6"><input id="6kqy6"></input></button>
  • <rt id="6kqy6"><tr id="6kqy6"></tr></rt>
    <rt id="6kqy6"><acronym id="6kqy6"></acronym></rt>
    千舍生物

    讓實(shí)驗(yàn)更省心!

    服務(wù)熱線:15371470969

    技術(shù)文章

    ARTICLE

    當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章血清中的沉淀是什么?WinSera胎牛血清隆重上市~

    血清中的沉淀是什么?WinSera胎牛血清隆重上市~

    更新時(shí)間:2022-07-14點(diǎn)擊次數(shù):1480

    1. 血清沉淀是什么?   

    血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的沉淀,其成分有多種類型,產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白(絮狀沉淀)、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀)、膽固醇等。

    纖維蛋白(Fibrin)

    血清中肉眼可見(jiàn)的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過(guò)程中,血清采集、過(guò)濾(3 次 0.1μm過(guò)濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時(shí)血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會(huì)發(fā)生凝集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。

    磷酸鈣(Calcium Phosphate)

    這是一種常見(jiàn)的沉淀成分,通常會(huì)造成血清出現(xiàn)云霧狀渾濁。當(dāng)血清在 37℃保存時(shí),這種現(xiàn)象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點(diǎn)的存在。這些小黑點(diǎn)在布朗運(yùn)動(dòng)的作用下四處游動(dòng),常被誤認(rèn)為是微生物污染。

    其他成分(Other)

    血清中的其他成分也會(huì)形成沉淀,例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。

    2. 沉淀是如何形成的?            

    造成沉淀的主要原因是溫度的改變、熱滅活、反復(fù)凍融、長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。

    3. 血清沉淀會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)嗎?

    我們?cè)诔鰪S前都會(huì)對(duì)血清進(jìn)行一系列質(zhì)檢測(cè)試,確保血清質(zhì)量達(dá)到嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。血清測(cè)試和細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)也表明,其沉淀成分不會(huì)影響血清作為細(xì)胞培養(yǎng)添加物的表現(xiàn)。這一點(diǎn)得到了眾多用戶和其他血清供應(yīng)商的肯定。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會(huì)發(fā)生凝集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。

    磷酸鈣顆粒經(jīng)常會(huì)被當(dāng)成微生物污染而引發(fā)不必要的擔(dān)憂。一般情況下,當(dāng)操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時(shí),常將其存放在 4℃冰箱中觀察,并考慮接下來(lái)是否繼續(xù)使用。但這樣會(huì)使沉淀進(jìn)一步增多,反而會(huì)使血清更加渾濁,進(jìn)而誤以為存在血清污染。并且,在倒置顯微鏡下,可在血清中觀察到小黑點(diǎn)(磷酸鈣顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)),更容易使人誤以為存在微生物污染。

    為防止這類誤解的產(chǎn)生,我們不建議用戶培養(yǎng)血清來(lái)驗(yàn)證是否存在污染,而是將血清直接接種在細(xì)菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),以觀察是否有細(xì)菌的增殖。并且,進(jìn)行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認(rèn)是否存在微生物污染。

     

    WinSera血清采用先進(jìn)的標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾,有效去除霉菌、細(xì)菌、酵母菌、支原體等,并通過(guò)ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證。

    4. 如何避免血清沉淀                

    正確解凍

    首先,應(yīng)按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或37℃水浴解凍,則非常容易產(chǎn)生沉淀。在解凍過(guò)程中,請(qǐng)注意,應(yīng)時(shí)不時(shí)緩慢搖晃血清瓶,可減少沉淀的產(chǎn)生。為避免反復(fù)凍融,建議您將血清分裝使用。

    使用和保存注意事項(xiàng)

    血清沉淀很難預(yù)測(cè)和避免,出現(xiàn)沉淀后也無(wú)需擔(dān)憂,這并不會(huì)影響血清的品質(zhì)。已知血清沉淀在以下條件下會(huì)有增多的可能:

     

    1) 熱滅活;

     

    2) 37℃培養(yǎng);

     

    3) 反復(fù)凍融;

     

    4) 伽馬射線照射;

     

    5) 2-8℃長(zhǎng)期保存;

     

    6) 長(zhǎng)期保存于可自動(dòng)化霜的冰箱中(溫度不穩(wěn)定);

    血清沉淀的形成機(jī)理多種多樣,具體的機(jī)理尚不十分明確。我們尚不能準(zhǔn)確預(yù)測(cè)和控制血清沉淀的產(chǎn)生。目前市面上所有品牌的血清產(chǎn)品都存在沉淀現(xiàn)象,這一點(diǎn)可以在各品牌網(wǎng)站上關(guān)于沉淀問(wèn)題的聲明上得到證實(shí)。

    5. 有沉淀時(shí)如何處理?             

    我們建議您采用2000rpm離心5分鐘,取上清使用就好,比過(guò)濾方便,不需要另外準(zhǔn)備濾芯和針筒,且不容易污染。

    血清產(chǎn)品中出現(xiàn)沉淀屬于正常現(xiàn)象,不會(huì)影響到血清的品質(zhì),對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)也不會(huì)產(chǎn)生影響,大家可以放心使用,若不立即使用,血清應(yīng)保存在-20℃以下。

    在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),我們經(jīng)常會(huì)聽(tīng)到一些專業(yè)名詞,原代培養(yǎng)是什么?什么是世代數(shù)?細(xì)胞系是什么?有限細(xì)胞系又代表的是什么?有的專有名詞搞不清楚的話,會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程也會(huì)有一定的影響。根據(jù)老師們的反饋,我們總結(jié)了以下容易混淆的概念供大家參考~

     

    1原代培養(yǎng)(Primary culture)

     

    開(kāi)始于直接取自生物體的細(xì)胞、組織或器官的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。通常代表異質(zhì)細(xì)胞群,很難標(biāo)準(zhǔn)化和繁殖。它們的壽命一般有限,而且已知它們會(huì)隨著時(shí)間而改變其差異特征。

     

    2傳代(Passage(Subculture))

     

    細(xì)胞從一個(gè)皿里轉(zhuǎn)移或傳代到另一皿里的過(guò)程稱為細(xì)胞傳代。這是一個(gè)操作行為,無(wú)法準(zhǔn)確定義細(xì)胞分裂次數(shù)。

     

    3傳代次數(shù)(Passage number)

     

    一種細(xì)胞被傳代培養(yǎng)的次數(shù)稱為傳代次數(shù)。

     

     

    4世代數(shù)(Generation number)

     

    一種細(xì)胞所經(jīng)歷的細(xì)胞數(shù)量倍增次數(shù)稱為世代數(shù)。

     

    5群體倍增時(shí)間(Population doubling time)

     

    在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中期細(xì)胞數(shù)量翻倍所需要的時(shí)間間隔稱為群體倍增時(shí)間。

     

     

    6群體倍增次數(shù)(Population doubling)

     

    在培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞所經(jīng)歷的細(xì)胞數(shù)量倍增次數(shù)稱為群體倍增次數(shù)。

     

     

    7細(xì)胞系(Cell line)

     

    原代細(xì)胞經(jīng)過(guò)第一次傳代后增殖的細(xì)胞稱為細(xì)胞系或亞克隆。隨著細(xì)胞的傳代,生長(zhǎng)能力*強(qiáng)的細(xì)胞會(huì)占據(jù)優(yōu)勢(shì),最終導(dǎo)致細(xì)胞群體在基因型和表現(xiàn)型上達(dá)到一定程度的均一性。

     

    8細(xì)胞株(Cell strain)

     

    細(xì)胞系通過(guò)選擇或克隆獲得的具有特征的細(xì)胞系稱為細(xì)胞株。與親代細(xì)胞系起始時(shí)相比,細(xì)胞株往往會(huì)獲得其他一些遺傳學(xué)改變。

     

    9有限細(xì)胞系(Finite cell line)

     

    通過(guò)傳代增殖但在體外只能增殖有限細(xì)胞數(shù)量的一種細(xì)胞稱為有限細(xì)胞系(通常60-70倍增次數(shù))。

     

    10衰老(Senescence)

     

    與染色體端粒縮短相聯(lián)系的生物調(diào)控的增殖潛力損失稱為細(xì)胞衰老。存活的細(xì)胞也可能保留一些功能活性。

     

    11永生化(Immortalization)

     

    獲得無(wú)限的壽命,可能是細(xì)胞自發(fā)產(chǎn)生的,也可能是以轉(zhuǎn)染引起的。

     

     

    12無(wú)限細(xì)胞系(Infinite/immortal/strain)

     

    具有無(wú)限增殖能力的細(xì)胞系或細(xì)胞株稱為無(wú)限細(xì)胞系/連續(xù)細(xì)胞系。

     

    13平板效率(Plating efficiency)

    在傳代培養(yǎng)中產(chǎn)生集落的細(xì)胞的百分比稱為平板效率。如果每個(gè)集落都可以說(shuō)是來(lái)自一個(gè)細(xì)胞,那么平板效率等同于克隆效率/集落形成效率。有時(shí),平板效率被粗略地用來(lái)描述傳代培養(yǎng)后存活的細(xì)胞數(shù)量,但這被更好地稱為種子效率。

    導(dǎo)致細(xì)胞污染的原因主要有以下幾方面:

    環(huán)境:水浴鍋、培養(yǎng)箱水盤(pán)、細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)壁、超凈臺(tái)、桌面及試劑瓶身、細(xì)胞房空氣消毒。

    操作:細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存等過(guò)程中也可帶入污染。

    試劑:血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胰酶、輔助試劑、營(yíng)養(yǎng)添加物等。

    耗材:培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭。

    細(xì)胞本身:本身攜帶污染、細(xì)胞老化、分化等。


    WINSERA®胎牛血清

    貨號(hào)

    規(guī)格

    庫(kù)存狀態(tài)

    優(yōu)級(jí)

    FBS500-WS-002

    500ML

    現(xiàn)貨

    特級(jí)

    FBS500-WP-002

    500ML

    現(xiàn)貨

    ES級(jí)別

    FBS500-WE-002

    500ML

    現(xiàn)貨

    無(wú)外泌體血清

    FBS050-EXO

    50ML

    現(xiàn)貨

    如何進(jìn)行污染源排查?

    *血清:其他試劑保持不變,僅更換血清。

    *基礎(chǔ)培養(yǎng)基:其他試劑保持不變,僅更換基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

    *PBS:其他試劑保持不變,僅更換PBS。

    *胰酶:若細(xì)胞復(fù)蘇的很好,一傳代就污染,可以嘗試其他試劑保持不變,更換消化用胰酶,看細(xì)胞狀態(tài)。

    細(xì)胞反復(fù)復(fù)蘇都會(huì)出現(xiàn)污染,那可保持培養(yǎng)體系不變,培養(yǎng)其他類型且適用于此培養(yǎng)體系的細(xì)胞,觀察是否有污染出現(xiàn)。整個(gè)營(yíng)養(yǎng)體系:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、營(yíng)養(yǎng)添加物都可使用控制變量法進(jìn)行排查。

    *耗材

    培養(yǎng)基及輔助試劑等條件不變,使用新耗材(培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭)培養(yǎng)細(xì)胞,觀察細(xì)胞是否有污染。

    *細(xì)胞本身

    細(xì)胞本身攜帶污染源。可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)(細(xì)菌、真菌、支原體)。

    細(xì)胞分化,細(xì)胞一旦分化,很難逆轉(zhuǎn),無(wú)法通過(guò)外界營(yíng)養(yǎng)體系和生長(zhǎng)條件的調(diào)整“*”。

    *細(xì)胞老化:細(xì)胞一旦老化,是無(wú)法逆轉(zhuǎn)的。

    因此,大家需要學(xué)會(huì)觀察細(xì)胞的形態(tài)并進(jìn)行分析,可以按照這幾點(diǎn)進(jìn)行控制變量排查,如若確認(rèn)是細(xì)胞本身問(wèn)題,若細(xì)胞本身不是很昂貴,建議丟掉重新培養(yǎng),若較珍貴,污染后可嘗試根據(jù)污染種類選擇合適的抗生素進(jìn)行殺滅,分化和老化是沒(méi)有辦法補(bǔ)救的。

     

    返回列表
    • 服務(wù)熱線 15371470969
    • 電子郵箱

      1171206955@qq.com

    • 本司產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床診斷和治療

    掃碼加微信

    Copyright © 2025 蘇州千舍生物科技有限公司版權(quán)所有    備案號(hào):蘇ICP備20017200號(hào)-1

    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    sitemap.xml

    主站蜘蛛池模板: 修文县| 安平县| 大化| 龙陵县| 乌兰浩特市| 周口市| 长葛市| 喜德县| 出国| 香格里拉县| 子洲县| 梁河县| 砀山县| 岚皋县| 民县| 巴塘县| 巍山| 郁南县| 密山市| 汕尾市| 福鼎市| 儋州市| 达州市| 清涧县| 乡城县| 连城县| 黄骅市| 永顺县| 扬中市| 东阳市| 靖安县| 威信县| 丰顺县| 北海市| 开化县| 信丰县| 澄迈县| 旺苍县| 台湾省| 哈巴河县| 海盐县|