WINSERA®胎牛血清有哪些重要指標(biāo)

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

一、內(nèi)毒素

內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的*成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí)，才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對(duì)細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代；內(nèi)毒素含量過高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國(guó)際上規(guī)定，胎牛血清的級(jí)別，應(yīng)以內(nèi)毒素水平的高低來確定，其中，特級(jí)胎牛血清的內(nèi)毒素應(yīng)<10EU/ml

二、血紅蛋白含量

胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高；反之，數(shù)值越低。實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響。這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。

三、總蛋白含量

胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛；數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。

四、pH值

根據(jù)藥典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間，并沒有什么具體依據(jù)把進(jìn)口血清和國(guó)產(chǎn)血清用7.5這個(gè)分界線界定。

五、滲透壓

胎牛血清滲透壓的檢測(cè)一般采用冰點(diǎn)法，滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：280-360之間

六、微生物

包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個(gè)品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高，細(xì)菌、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無(wú)菌過濾去除。如CellMax胎牛血清，3次0.1um無(wú)菌過濾以后，又通過培養(yǎng)法和DNA染色法進(jìn)行支原體檢測(cè)，結(jié)果均呈現(xiàn)陰性才會(huì)放行銷售。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無(wú)法過濾，很難*清除，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大，不過對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來說，往往會(huì)采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。

七、免疫球蛋白

免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血時(shí)的牛齡情況，新生牛血清容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高；胎牛血清不含IgM，IgG的含量也較低。可以通過血清蛋白電泳SDS檢測(cè)。

低IgG的胎牛血清推薦適用于抗體生產(chǎn)及相關(guān)領(lǐng)域。

培養(yǎng)細(xì)胞死亡
可能原因：
1.培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；
2.培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；
3.細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；
4.培養(yǎng)液滲透壓不正確；
5.培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積 。
解決方法：
1.檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；
2.檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；
3.取新的保存細(xì)胞種；
4.檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；
5.換入新鮮培養(yǎng)液。

WINSERA®特級(jí)胎牛血清適合培養(yǎng)哪些細(xì)胞？

1、特級(jí)胎牛血清具有非常的促細(xì)胞生長(zhǎng)能力，適合培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞，原代細(xì)胞，部分干細(xì)胞和嬌貴細(xì)胞。

2、血清如何保存, 可以放多久？

3、貯藏溫度≤-15℃，可長(zhǎng)時(shí)間保存； 4℃存放時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。

4、血清溶解以后，出現(xiàn)沉淀怎么辦?

5、若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400-600g離心5min，上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。 我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物， 一方面它可能會(huì)阻塞您的過濾膜；另一方面，過濾血清這種行為可能會(huì)導(dǎo)致血清中部分營(yíng)養(yǎng)成分的流失。