人膠質母細胞瘤T98G產品說明書

產品名稱：人膠質母細胞瘤T98G

細胞特性

1）來源：腦

2）形態：成纖維細胞，貼壁生長

3）含量：>1x106

4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。

細胞用途：僅供科研使用。細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的*培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。                      

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備1640 培養基；優質胎牛血清，10%；P/S雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，*培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

人膠質母細胞瘤T98G

膠質母細胞瘤（Glioblastoma）

1.要點（Key concepts）

■膠質母細胞瘤（WHO IV級）又稱為多形性膠質母細胞瘤（glioblastoma multiform），是惡性程度高的星形細胞瘤。可以從彌漫性星形細胞瘤進展而來（繼發性膠質母細胞瘤），也可以是沒有低度惡性前期病變的原發性膠質母細胞瘤。后者更為常見。

■原發性膠質母細胞瘤多發生于老年人，平均年齡55歲，臨床病史短，常常少于3個月；繼發性膠質母細胞瘤則常發生于小于45歲的年輕人，病史較長，少則不到1年，多則10余年，平均4～5年。

■ 浸潤性擴散是彌漫性星形細胞瘤的特點，而膠質母細胞瘤則可更迅速向周圍腦組織擴散。常見的擴散途徑是通過胼胝體、內囊、穹隆、前聯合以及視放射直接蔓延，其他的擴散途徑包括腦脊液、血管周圍間隙。通過血源性轉移到顱外罕見。

■ 多灶性（multifocal）和多中心（multicentric）膠質母細胞瘤的區別在于，前者常見，病灶相距較近，鏡下見相互之間有關聯；后者少見，病灶之間相距較遠，鏡下見病灶間無關聯。

■ 巨細胞膠質母細胞瘤（giant cell glioblastoma）和膠質肉瘤（gliosarcoma）是膠質母細胞瘤的亞型，分別占膠質母細胞瘤的5%和2%。

2.概述（Brief introduction）

■ 占腦星形細胞腫瘤的60%～75%。

■ 好發于中年人，45-75歲多見，約80%患者年齡大于50歲。男性略多于女性，男女比為1.28:1。

■ 多發生于大腦半球皮質下白質區，根據發生頻率從高到低依次為顳葉、頂葉、額葉和枕葉。腫瘤常常浸潤到鄰近皮質，或通過胼胝體侵犯到對側大腦半球。兒童膠質母細胞瘤常位于基底節和丘腦。人高轉移鼻咽癌細胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    貼壁生長

人鼻咽癌細胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

人鼻咽癌細胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長

人卵巢癌細胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌細胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌細胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌細胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高轉移卵巢癌細胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰島素

人卵巢癌細胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

倉鼠卵巢細胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1（懸浮） CHO GROW CD2培養基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

倉鼠卵巢細胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高轉移肺癌細胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌細胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞熒光素酶標記 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌細胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌細胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞熒光素酶標記 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%（10mM）HEPES +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes+1%PS

人經典小細胞肺癌細胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 細胞漲的慢2-3周發貨

人肺癌細胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌細胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞(淋巴結轉移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大細胞肺癌細胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小細胞肺癌細胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1% PS

小鼠肺癌細胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦髓母細胞瘤細胞 D283 Med  MEM+10%FBS+1%P/S

人腦髓母細胞瘤細胞 D341 Med MEM+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+10%FBS+1%P/S  

永生化人腦微血管內皮細胞 HCMEC/D3 內皮細胞培養體系（PriMed-iCell-002）

人腦膠質瘤細胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S  

人腦膠質細胞瘤細胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人腦膠質瘤 SNB-19 DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦膠質瘤 TJ905 DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤 U118MG（U-118MG） DMEM+10%FBS+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤 U87MG MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

人腦星形膠質母細胞瘤+RFP U87MG+RFP MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

小鼠腦神經膠質母細胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠腦微血管內皮細胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S  

小鼠腦神經瘤細胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S

小鼠腦神經瘤細胞熒光素酶標記 neuro-2a+luc MEM+10%FBS+1%P/S

大鼠腦膠質瘤細胞 C6 F12K +2.5%FBS+15%HS（馬血清）+1%P/S

大鼠腦膠質瘤細胞綠色熒光標記 C6+LUC F12K +2.5%FBS+15%HS（馬血清）+1%P/S

大鼠腦星形膠質細胞 CTX DMEM+10%FBS+1%P/S  

大鼠腦I型星形膠質細胞 CTX-TNA2 DMEM+10%FBS+1%P/S

大鼠腦間質細胞 DI TNC1 DMEM+10%FBS+1%P/S