5.血清解凍以后出現了懸浮物是什么?還能繼續用嗎?
解凍以后如果發現有少量乳白色的絮狀或者點狀物質,這種主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用400×g離心5 min取上清。不會對細胞有太大的影響。
6.血清在使用前是否需要對血清進行過濾?
一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
7.使用血清培養細胞以后,鏡下觀察到會動的“小黑點"會是污染嗎?
如果您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,黑點是否做不規則游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:
(1)細胞生長過程中自然破碎后的細胞殘骸;
(2)血清中的雜蛋白,可能是反復凍融的結果;
(3)配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;
(4)培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
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