細胞培養(yǎng)過程中為什么會產(chǎn)生小黑點？

細胞培養(yǎng)過程中為什么會產(chǎn)生小黑點？

1、生產(chǎn)工藝 在細胞培養(yǎng)過程中加入胎牛血清出現(xiàn)了小黑點，并且隨著培養(yǎng)過程小黑點越來越多，這與胎牛血清的生產(chǎn)工藝有很大關系。目前胎牛血清的生產(chǎn)主要有兩種工藝：① 自然凝聚生產(chǎn)獲得血清，該生產(chǎn)控制要求嚴格，自然凝集的胎牛血幾乎不會出現(xiàn)小黑點。② 離心生產(chǎn)血清，該工藝可能會導致小黑點的產(chǎn)生。

2、細胞老化在細胞的表面出現(xiàn)小黑點，表明細胞老化，在細胞間隙間出現(xiàn)的小黑點，說明細胞營養(yǎng)不足導致細胞碎片化，需要更換細胞或者更換等級更高的血清。

3、實驗污染細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的小黑點也有可能是因為出現(xiàn)了污染。當有小黑點形成后判斷是細胞污染還是細胞碎片，首先通過在鏡下觀察小黑點運動狀態(tài)，很多會動的小黑點只是發(fā)生布朗運動的細胞碎片，而細菌在運動上則較為活躍和浮躁。然后判斷培養(yǎng)基的渾濁程度，如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。

如何避免胎牛沉淀出現(xiàn)及培養(yǎng)基中小黑點的生成？

采用正確的解凍方法1、2℃~8℃解凍；2、解凍的過程中間斷搖勻（隔一段時間輕柔搖勻）；3、室溫或者水浴溶解均易造成沉淀增多。

正確使用和保存

1、非必須不用熱滅活（熱滅活會使血清中部分蛋白質(zhì)變性析出，影響血清品質(zhì)）；2、不宜37℃預熱，血清和培養(yǎng)基通常室溫預熱即可；3、避免反復凍融；4、避免紫外線照射；5、避免2-8℃長期保存，分裝后-