無外泌體胎牛血清|WINSERA現貨
在細胞培養實驗中,胎牛血清(FBS)一直是不能缺少的營養補充劑。然而,傳統FBS中含有大量外泌體,可能干擾實驗結果,特別是在干細胞研究、腫瘤微環境分析及外泌體相關實驗中。蘇州千舍生物科技有限公司推出的無外泌體特級胎牛血清(Exosome-Free FBS),通過超高速離心結合納米過濾技術,有效去除外泌體,確保實驗數據的準確性和可重復性。
貨號: FBS050-EXO
規格:50ML
品牌:WINSERA
關鍵優勢:
高純度:外泌體去除率>99%,避免外源性RNA、蛋白質干擾
高穩定性:批次間差異極小,適用于長期實驗
低內毒素:<1 EU/mL,減少細胞毒性風險
外泌體的分離方法這么多,選擇哪種更好?
答:外泌體的分離純化一直是科研工作者關注的問題,獲得高純度的外泌體對后續的研究至關重要。據了解,目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、 超濾、 沉淀或試劑盒等方法實現外泌體的提取分離:
1、 超速離心法(差速離心)超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行( 如圖所示) ,可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩定(可能與轉子類型有關),純度也受到質疑;此外,重復離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質量。
2、密度梯度離心在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層,是一種區帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在 1.13-1.19g/ml
的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時。
3、超濾離心由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。
4、磁珠免疫法外泌體表面有其特異性標記物(如 CD63、 CD9 蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受 pH 和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以廣泛普及。
5、PEG-base 沉淀法聚乙二醇( PEG)可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀,早先應用于從血清等樣本中收集病毒,現在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多( 假陽性),顆粒大小不均一,產生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20 等化學添加物將會破壞外泌體等,因此發表文章時易受質疑。
6、 試劑盒提取近幾年來,市場上已出現各種商業化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。
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