A0500-3010胎牛血清使用步驟說明

A0500-3010胎牛血清使用步驟說明

胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）是由胎牛血凝集而成的液體組分，不含細胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量細胞生長所必需的營養因子和大分子因子。牛血清白蛋白是牛血清蛋白的主要成分。胎牛血清中的生長因子對培養細胞的維持和生長是需要的。FBS還含有各種小分子，如氨基酸、糖、脂和激素。

胎牛血清的主要用途之一是真核細胞培養，其濃度高達20%甚至更高，可提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養和生長因子。然而，要注意到，人類細胞培養中的胎牛血清可能會引入人工制品；用人血清培養的人細胞與用胎牛血清培養的人細胞的行為不同。FBS還用于人類和獸用疫苗以及生物技術藥物的研究、制造和控制，并用于阻止胰蛋白酶消化或作為低溫保存的保護劑。

1.血清解凍

建議將血清從冰箱先移至2-8℃冰箱解凍，不宜在較高溫度下進行解凍，解凍溫度較高會導致血清渾濁、沉淀增加、品質下降等問題。解凍過程中需要輕輕搖晃混合，嚴禁將血清直接放在37℃長時時間孵育解凍。

如您是儲存在-80℃的血清，需提前幾天轉移至-20℃冰箱中(至少24小時)，使用前轉移至4℃冰箱中緩慢融化，融化過程中需不定期多次緩慢輕柔搖動瓶身使血清混勻，搖晃過程中避免劇烈搖晃產生泡沫。

2.血清濃度

原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔，部分細胞原代提取時會使用20%血清，大部分細胞正常培養時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調校。

3.血清熱滅活

血清熱滅活是為了去除補體，補體是免疫系統的一部分，在體內可通過多條途徑被激活，從而發揮調理吞噬裂解細胞、介導炎癥、免疫調節和清除免疫復合物等多種作用。如果不涉及以上實驗，可以不進行血清熱滅活。

4.血清試用：

血清開始進行試用時，如果是重新復蘇細胞，建議用原培養體系進行細胞復蘇，待細胞狀態進入狀態后再進行測試。測試時不建議直接100%直接換成新血清體系進行培養，而應該按照比例進行梯度替換(例如，換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后替換。對于一些對培養體系比較敏感的細胞，可以進一步優化替換比例。)通過這種方法可以避免細胞因環境改變而出現應激或者異常造成不必要的損失。

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