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胎牛血清品質(zhì)的正確認(rèn)識(shí)1)胎牛血清是品質(zhì)高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少;2)應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛,新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛;3)由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題,在保證質(zhì)量的前提下...
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ELISA試劑盒常見問題01問:看說明書里,如果樣本濃度高,可以不用稀釋,直接加原液。這個(gè)直接加血清原液,你們自己親自做過嗎?因?yàn)橹拔覀冇脛e家的,他們說明書里,加樣是:10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們?nèi)绻绻麧舛雀撸梢约釉簡幔克麄冋f可以,可能他們沒做過,說可以。可我們做了,不可以。問他們,又說是可能離子濃度不夠。答:ELISA試劑盒檢測(cè)范圍是固定的,樣本是否稀釋是根據(jù)樣本實(shí)際濃度來選擇的,但前提條件樣本要落在檢測(cè)范圍內(nèi),濃度高于檢測(cè)范圍,稀釋樣本達(dá)到檢測(cè)范圍內(nèi)...
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固體樣本處理問題01組織樣本操作流程:1、組織樣本必須保持鮮重,如果是凍存的組織,應(yīng)該室溫平行2小時(shí)以上,然后用生理鹽水沖洗干凈,再用濾紙把周圍的水分吸干,稱重!組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)勻漿的比例為1:10,相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后,離心取上清,離心轉(zhuǎn)數(shù)為5000轉(zhuǎn),但不能超過5000轉(zhuǎn),時(shí)間為15分鐘。4、實(shí)驗(yàn)中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣...
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細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是是什么?如何處理?1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):(1)細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可...
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胎牛血清和新生牛血清的有何區(qū)別,如何選擇?兩者所含的促細(xì)胞因子、促貼附因子、IgG等其他活性物質(zhì)等組分與比例均有不同,進(jìn)口和部分國產(chǎn)胎牛血清通過心臟穿刺采血,而還有部分國產(chǎn)胎牛血清采自出生后8小時(shí)內(nèi)的胎牛血。Cell-Box采血工作人員經(jīng)過長達(dá)18個(gè)月以來的血源地篩選,通過一系列指標(biāo)檢測(cè)及試驗(yàn)對(duì)照,以極其苛刻的標(biāo)準(zhǔn)要求精選了國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的血源地,并簽署了合作協(xié)定。每批次血清經(jīng)過批量混合后,連續(xù)3級(jí)0.1um精過濾制成。在定量灌裝后,又通過一系列的指標(biāo)檢測(cè)、多種細(xì)胞的培養(yǎng)測(cè)試和符...
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1.一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):(1)細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;(3)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除...
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這是在胎牛血清使用過程中,常常出現(xiàn)的問題,關(guān)于這個(gè)問題的解答如下:1.血清中含有微量的血紅蛋白,與采集血液過程中細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi),顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān),不影響細(xì)胞培養(yǎng)。國家藥典規(guī)定≤20mg/dL(注:1dL=100ml),也寫作<0.02%(w/v)。1.培養(yǎng)嬌貴原代細(xì)胞或干細(xì)胞,建議選用澳洲血源或新西蘭血源的FBS,由于國內(nèi)市場(chǎng)FBS品種繁多雜亂,其中,不乏水貨、假貨,極易混淆用戶的選購視線。為節(jié)省用戶的寶貴時(shí)間及進(jìn)度,且應(yīng)選擇能...
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血清在運(yùn)輸過程中,均采用全程干冰運(yùn)輸,但由于不可控因素(天氣、路途)已經(jīng)部分解凍,血清仍然可以使用,但是建議先將血清在2-8℃冷藏中充分解凍,之后通過輕微搖晃混勻后,再移至-20℃進(jìn)行凍存。1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫(yī)用冰箱。血清解凍時(shí),應(yīng)從-80℃先轉(zhuǎn)移至-20℃再轉(zhuǎn)移至2-8℃依次過夜升溫解凍,待胎牛血清在2-8℃基本解凍后,再轉(zhuǎn)移至室溫(16℃-25℃)*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過程中,需要有規(guī)則的輕微搖晃,使之混勻,避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚...
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