胎牛血清注意事項

胎牛血清注意事項

如果不能短期內使用完畢，解凍后請適當分裝。血清結冰時體積會增加約10%，因此在分裝血清時須使分裝瓶預留一定體積空間，否則易導致分裝瓶凍裂而發(fā)生污染。
熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中需有規(guī)則地搖晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補體(complement)。除非必須，一般不推薦對血清進行熱處理。因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與的反應有：細胞毒作用、平滑肌細胞收縮、肥大細胞和血小板釋放組胺、增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化等。
瓶裝血清解凍需采用緩慢解凍法：把在-15 ~ -40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解凍約1天，待全部解凍后再分裝。在解凍過程中每隔約2小時可輕輕搖晃均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃或更低 溫度進入37℃水浴解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀，從而使用血清的質量下降。
血清中的絮狀沉淀物主要是解凍后血清中纖維蛋白及4℃長時間保存后血清中的脂蛋白變性造成的，這些絮狀物不會影響血清本身的質量，可不用處理。如果必須要處理，可400g離心5分鐘去除。但不宜過濾去除，因為絮狀物可能阻塞濾膜。
經(jīng)過熱處理的血清中沉淀物會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點"，而且由于這些“小黑點"的布朗運動在顯微鏡下被放大，感覺是在游動，所以經(jīng)常被誤認為血清被微生物污染。通常這些小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清存在微生物污染，則應立即停止使用，更換另一批次的血清。可將適量血清用培養(yǎng)液稀釋至10%濃度后培養(yǎng)1-3天，觀察小黑點是否急劇增多，或取適量血清在LB平板上涂板培養(yǎng)觀察是否產(chǎn)生菌落，以確定是否存在微生物污染。
請勿將血清在37℃放置過長時間，否則血清會逐漸變渾濁，同時血清中的有效成分也會逐漸失活而影響血清質量。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。