收集腫瘤細胞外泌體

外泌體的研究離不開細胞培養。以腫瘤相關外泌體研究為例，目前，收集腫瘤細胞外泌體主要有兩種方法：

方法一

使用正常培液養細胞再換無血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養基用于培養細胞收外泌體。

首先，就是基本的離心條件了，目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了，這兩家超離在行業內算是翹楚了。其次就是離心參數了：120000 g，4℃，離心14h，離心結果如圖：

1：離心后，血清外泌體會富集在管底和管壁；

2：吸取血清時，只吸取澄清部分的血清，并且遠離上圖中標記的區域；

3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：動作慢，動作輕）

4：其余的渾濁血清留作正常細胞的的營養物添加使用，避免浪費。

5：如果覺得純度不夠，再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6：針對超速離心后的血清，必須進行粒徑檢測（離心前樣品和離心后樣品），該數據可以放到文章補充材料中，用來證明無血清外泌體制備成功。