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ELISA試劑盒常見問題01問:看說明書里,如果樣本濃度高,可以不用稀釋,直接加原液。這個直接加血清原液,你們自己親自做過嗎?因為之前我們用別家的,他們說明書里,加樣是:10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們如果如果濃度高,可以加原液嗎?他們說可以,可能他們沒做過,說可以。可我們做了,不可以。問他們,又說是可能離子濃度不夠。答:ELISA試劑盒檢測范圍是固定的,樣本是否稀釋是根據樣本實際濃度來選擇的,但前提條件樣本要落在檢測范圍內,濃度高于檢測范圍,稀釋樣本達到檢測范圍內...
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固體樣本處理問題01組織樣本操作流程:1、組織樣本必須保持鮮重,如果是凍存的組織,應該室溫平行2小時以上,然后用生理鹽水沖洗干凈,再用濾紙把周圍的水分吸干,稱重!組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)勻漿的比例為1:10,相當于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后,離心取上清,離心轉數為5000轉,但不能超過5000轉,時間為15分鐘。4、實驗中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣...
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細胞培養中出現黑點是是什么?如何處理?1.一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;(2)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;(3)培養原代細胞中出現小黑點,可...
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胎牛血清和新生牛血清的有何區別,如何選擇?兩者所含的促細胞因子、促貼附因子、IgG等其他活性物質等組分與比例均有不同,進口和部分國產胎牛血清通過心臟穿刺采血,而還有部分國產胎牛血清采自出生后8小時內的胎牛血。Cell-Box采血工作人員經過長達18個月以來的血源地篩選,通過一系列指標檢測及試驗對照,以極其苛刻的標準要求精選了國內外優質的血源地,并簽署了合作協定。每批次血清經過批量混合后,連續3級0.1um精過濾制成。在定量灌裝后,又通過一系列的指標檢測、多種細胞的培養測試和符...
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1.一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;(2)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;(3)培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除...
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這是在胎牛血清使用過程中,常常出現的問題,關于這個問題的解答如下:1.血清中含有微量的血紅蛋白,與采集血液過程中細胞的破裂數目有關。只要血紅蛋白的含量在藥典規定范圍內,顏色的深淺和血清品質無關,不影響細胞培養。國家藥典規定≤20mg/dL(注:1dL=100ml),也寫作<0.02%(w/v)。1.培養嬌貴原代細胞或干細胞,建議選用澳洲血源或新西蘭血源的FBS,由于國內市場FBS品種繁多雜亂,其中,不乏水貨、假貨,極易混淆用戶的選購視線。為節省用戶的寶貴時間及進度,且應選擇能...
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血清在運輸過程中,均采用全程干冰運輸,但由于不可控因素(天氣、路途)已經部分解凍,血清仍然可以使用,但是建議先將血清在2-8℃冷藏中充分解凍,之后通過輕微搖晃混勻后,再移至-20℃進行凍存。1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫用冰箱。血清解凍時,應從-80℃先轉移至-20℃再轉移至2-8℃依次過夜升溫解凍,待胎牛血清在2-8℃基本解凍后,再轉移至室溫(16℃-25℃)*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過程中,需要有規則的輕微搖晃,使之混勻,避免血清中的蛋白物質凝聚...
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1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫用冰箱。血清解凍時,應從-80℃先轉移至-20℃再轉移至2-8℃依次過夜升溫解凍,待胎牛血清在2-8℃基本解凍后,再轉移至室溫(16℃-25℃)*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過程中,需要有規則的輕微搖晃,使之混勻,避免血清中的蛋白物質凝聚致使產生絮狀物。血清溶解后,若一次無法用完一瓶,可將血清分裝在無菌、無熱原的容器內密封冷凍儲存。2.血清切勿直接從-20℃轉移至常溫以及37℃或56℃溫水浴解凍。溫差太大極易產生沉淀,在37...
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