體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及操作步驟

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及操作步驟1、瘤細(xì)胞懸液接種（1）無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞。（2）在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液。（3）培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍。（4）計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107～108／ml。（5）常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml／部位，＞106細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些。（6）次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種...

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GEMINI胎牛血清

GEMINI胎牛血清貨號(hào)：900-108美國GeminiBio是被FDA認(rèn)可的提供細(xì)胞培養(yǎng)用的生物產(chǎn)品和化學(xué)試劑的公司，產(chǎn)品包括人和動(dòng)物的血清和其它用于細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)產(chǎn)品，細(xì)胞因子重組蛋白等。Gemini公司，成立于1985年，位于加利福尼亞南部Calabasas市，1999年，遷至加利福尼亞北部Woodland市。Gemini公司在銷售的動(dòng)物血清產(chǎn)品，全部來自于澳洲的子公司，血源主要為澳大利亞、新西蘭、巴拿馬、烏拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始終以“為客戶提供高質(zhì)量產(chǎn)品...

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WinSera無外泌體血清的常見問題？

WinSera無外泌體血清的常見問題？能不能用無血清培液養(yǎng)，能不能用正常培液養(yǎng)到70%換無外泌體血清的培液？有些paper確實(shí)會(huì)使用無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞然后收上清分離外泌體，論壇中也有已經(jīng)發(fā)表文章的朋友使用該方法，該方法是使用含有外泌體的血清培養(yǎng)細(xì)胞到一定密度，然后吸去培液，PBS洗數(shù)次之后換無血清培液進(jìn)行培養(yǎng)即可。但是目前很多高檔次的paper基本都是使用含無外泌體血清的培液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的，無外泌體血清可以按照之前hzangs的推文介紹的方法制備。如果你的無外泌體血清比較珍...

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怎么做好微生物污染的預(yù)防？

怎么做好微生物污染的預(yù)防？微生物污染在細(xì)胞培養(yǎng)中是非常常見的，也是令人頭大的一件事情。所以我們一定要將問題扼殺于搖籃之中，規(guī)范實(shí)驗(yàn)中的各個(gè)步驟，確保細(xì)胞“寶寶”在無污染的情況下健康成長。1．實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，準(zhǔn)備好所需的試劑和器材。玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒：1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上；2)干烤消毒140℃2小時(shí)以上。2．培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗(yàn)：將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁...

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最佳細(xì)胞死亡方式——細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是程序性細(xì)胞死亡的最佳表征形式，不會(huì)引起炎癥反應(yīng)，對(duì)器官發(fā)育、組織重塑、免疫反應(yīng)和腫瘤抑制至關(guān)重要。研究表明細(xì)胞凋亡有兩種主要途徑：內(nèi)在或線粒體途徑、外在或死亡受體途徑。內(nèi)在或線粒體途徑是通過內(nèi)在途徑的細(xì)胞凋亡，可由任何引起氧化應(yīng)激、線粒體紊亂和DNA損傷的刺激物觸發(fā)，例如癌癥治療劑、缺氧、缺血再灌注損傷和電離輻射。線粒體損傷可導(dǎo)致線粒體外膜透化，促進(jìn)細(xì)胞色素釋放到細(xì)胞質(zhì)中，釋放的細(xì)胞色素然后結(jié)合Apaf-1，從而通過激活procaspase9并形成稱為“凋亡體”的復(fù)...

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腎細(xì)胞相關(guān)知識(shí)~~

腎臟細(xì)胞是不能再生的！當(dāng)我們喝的水當(dāng)中的雜質(zhì)含量過高的時(shí)候，腎臟就承擔(dān)著非常沉重的過濾負(fù)擔(dān)，一旦一些雜質(zhì)不能很好有效的被過濾掉，它們就會(huì)緩慢地在我們體內(nèi)積累下來，日久年深，就很可能會(huì)形成結(jié)石(膽結(jié)石、腎結(jié)石、膀胱結(jié)石、尿道結(jié)石、輸卵管結(jié)石等)。同時(shí)，還可能會(huì)損傷我們的腎臟細(xì)胞。您知道嗎——人的腎臟細(xì)胞是不能再生的，一旦受損之后就再也無法修復(fù)。一個(gè)正常人的腎臟在二十歲之后就會(huì)隨著年齡的增長而逐漸縮小，到了七八十歲的時(shí)候，如果還能健康的活著，那他腎臟的大小卻只剩下他年輕時(shí)候的三分...

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“黑色素瘤細(xì)胞”你了解多少？

黑色素瘤中腫瘤細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的互作異質(zhì)性導(dǎo)致了不同患者免疫治療臨床獲益的巨大差異。先前研究揭示出腫瘤微環(huán)境細(xì)胞的空間分布和功能狀態(tài)具有高度異質(zhì)性。而黑色素瘤中，腫瘤細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞之間是否存在串?dāng)_傾向，以及這種串?dāng)_傾向如何影響患者的臨床預(yù)后尚不清楚。本研究利用公開的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，在黑色素瘤中發(fā)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的異質(zhì)性功能狀態(tài)和他們之間廣泛的配體-受體互作。此外，基于細(xì)胞間通信強(qiáng)度和細(xì)胞狀態(tài)活性之間的關(guān)聯(lián)，作者確定了腫瘤中間狀態(tài)和CD8+T細(xì)胞耗竭狀態(tài)...

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新買的胎牛血清有哪些注意事項(xiàng)？

市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|(zhì)。好不容易在眾多品牌中挑選出誠心如意的產(chǎn)品后，那我們就可以安心使用了嘛？不盡然，我們匯總小伙伴經(jīng)常咨詢的一些問題。1、為何上次購買的同一貨號(hào)的血清培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)差異那么大？如何避免此影響？答：因?yàn)檠鍋碓从趧?dòng)物，其組成成分有1000種左右，每個(gè)批號(hào)的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對(duì)細(xì)胞的影響，建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試，篩選合適的批號(hào)，備好庫存（血清未開封時(shí)，在-20℃下可保存5年）。如需...

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