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—胎牛血清有必要熱滅活嗎—01目的血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min,然后將它們分裝儲存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補體等對熱敏感的物質,以排除對免疫分析的影響。胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進行測定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分僅有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗,我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相...
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血清的供應量改變帶來的價格波動由于中國海關總署對供應企業(yè)和允許進口的血源地做出了明確規(guī)定,胎牛血清的價格便與這些血源產地的供應量息息相關。胎牛血清是一種天然產物,產地牛源的健康狀況和生長環(huán)境尤為重要,當牛源產地氣候變化時,會極大的影響胎牛血清的產量。例如2018年澳洲地區(qū)發(fā)生干旱,導致農場主不得不屠宰超量的牛以避免損失,這種情況間接導致當年澳洲血源的胎牛血清供應鏈同比往年有一個顯著的增長。所以說,跟一般的商品不同,胎牛血清的供應量并非僅由胎牛血清的市場需求決定,而是由當年的氣...
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一般在拿到細胞后,應該注意什么?收到細胞后先不要開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議對收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培...
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血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會聚集成團,形成絮狀沉淀或外觀混濁;在運輸過程中,由于時間較長,所以往往有少許解凍,因此也可能稍有沉淀,但這些都不影響血清性能。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
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如何構建耐藥細胞株?腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥性是腫瘤治療失敗的重要因素之一,成為目前阻礙腫瘤治療的絆腳石。因此,探索腫瘤細胞產生耐藥的原因以及如何改善腫瘤細胞對化療藥物耐藥仍是目前研究的熱點和難點。腫瘤細胞耐藥的產生是一個復雜的過程,它的機制廣泛牽涉到藥物代謝學、病理學、生理學等多個學科,這就決定了腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥的機制是復雜的,因此體外建立化療藥物耐藥細胞株仍然是研究腫瘤細胞耐藥機制的重要方法。一種藥物長期作用于某類細胞,殺死其中沒有抗性的細胞,而對這類細胞中具...
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ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,用于對液體樣本中的目標物質進行定性和定量檢測。隨著國家對科研項目的重視,在科研單位和廣大科研類院校也越來越受歡迎。ELISA試劑盒之所以受歡迎和它自身的優(yōu)點是分不開的。首先適合檢測的樣本很廣泛包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,具體根據試劑盒說明書決定,通常檢測靈敏度比較高。其次ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應的...
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24、培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復凍融產生的蛋白沉淀引起的,也可能是細胞的代謝產物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細菌污染。25、如何預防細胞培養(yǎng)中黑點的產生?掌握細胞傳代的最佳時機,不要...
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